יצירת ספריית cDNA

למדנו בכיתה שכאשר יוצרים ספריית DNA גנומי, חותכים DNA מסוים באנזימי הגבלה (שחותכים חיתוך מדורג וכך משאירים קצוות דביקים), וחותכים DNA של נשאים באנזימי הגבלה זהים, וכך ניתן להחדיר את המקטעים שנוצרו מהDNA שחתכנו אל תוך הנשאים (הקצוות הדביקים מתחברים).
בנוסף, למדנו שביצירת ספריית cDNA, מפיקים את כל הmRNA מתא מסוים, מתעתקים במהופך את הRNA לDNA, ואז את הDNA שנוצר מחדירים לנשאים.
השאלה שלי היא איך מחדירים את הDNA שיצרנו, שהרי אין לו קצוות דביקים, ולא ניתן לחתוך אותו עם אנזימי הגבלה (על מנת ליצור קצוות דביקים), שכן כל הרצף שבידנו הוא CDS ולכן אי אפשר להוריד חלקים ממנו.
ואם הפתרון הוא פשוט, ויש שיטה להחדיר DNA עם קצוות רגילים (ולא דביקים) בעזרת חיתוך חלק של DNA הנשא, אז מדוע משתמשים בקצוות דביקים כאשר יוצרים ספריית DNA גנומי?

אשמח לתשובות,
תודה רבה, פלג אופק.

כתיבת תגובה

דילוג לתוכן